营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)

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  • 商品名称:营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)
  • 商品编号:022020
  • 品牌:环凯
  • 上架时间:2017-06-02
  • 商品毛重:0克

022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)

  (Nutrient Agar)

  用 途:

  营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO标准)。

  原 理:

  蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

  配方(每升):

  蛋白胨10g

  牛肉膏粉3g

  氯化钠 5g

  琼脂15g

  最终pH 7.3±0.2

  使用方法:

  1、 称取营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)33g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。

  2、 (食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。依次做1:100,1:1000……稀释液。

  3、 根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。

  4、 稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

  5、 观察结果。

  6、 菌落计数方法:

  做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

  7、 菌落计数的报告:

  选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计

  A:稀释度的选择:

  应选择平均菌落数在30—300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见附表)。

  若有两个稀释度.其生长的菌落数无均在30—300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,则应报告其平均数;若大于2则报告其较小的数字(见表中例2及3)。

  若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。

  若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最底的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。

  若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最底稀释倍数报告之(见表中例6)。

  若有稀释度的平均菌菌落数均不在30—300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。

  菌落数的报告:

  菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位数字后面的有效数值,以四舍五入法计算。为了缩短数字后面的零数,也可以用10的指数来表示(见表中“报告方式栏”)。

  稀释度选择及菌落数报告方式

  质量控制:

  本品接种下列菌株,置于36±1℃温箱中培养48±2h,结果如下:

  贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

  规 格: 250g

  参考文献:

  1. GB15979-2002 中华人民共和国国家标准 一次性使用卫生用品卫生标准

  2. GB/T 4789 .2—2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 菌落总数测定

  3. GB15981-1995 中华人民共和国国家标准 消毒与灭菌效果的评价方法与标准

  4. ISO 21528-1;2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae-----Part1 Detection and enumeration by MPN technique with pre-enrichment

  5. ISO 21528-1;2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae-----Part 2 Colony-count method

  6.ISO 6579:2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.

  7.ISO 10273-2003 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica

 

  8.ISO6785-2001 Milk and milk products-----Detection of Salmonella spp


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